Dìreach RT-qPCR Kit II
Tuairisgeul Kit:
◮Bidh Kit RT-qPCR dìreach, a ’cleachdadh Foreasy Reverse Transcriptase agus Foreasy HS Taq DNA Polymerase a’ leasachadh le Foregene, le bufair freagairt gun samhail, a ’dèanamh an uidheamachd seo le strì làidir agus co-chòrdalachd, agus faodaidh e deuchainn a dhèanamh gu dìreach air cleachdadh siostam Foregene Lysis mar theamplaid.Faodaidh an uidheamachd seo tagradh a dhèanamh airson pasgan lorg searbhag niuclasach COVID-19 agus leasachadh uidheamachd lorg searbhag niuclasach bacteria pathogenic eile.
Tuairisgeul
Bidh Kit RT-qPCR dìreach a’ toirt seachad bufair RT-qPCR air a phacaigeadh air leth, Foreasy HS Taq DNA Polymerase àrd-èifeachdachagus Foreasy Reverse Transcriptase (MMLV),ga dhèanamh goireasach airson innealan cùl-taic agus atharrachadh siostam a chruthachadh, taobh a-staigh dearbhadh sìmplidh.
Bidh Kit RT-qPCR dìreach, a ’cleachdadh Foreasy Reverse Transcriptase agus Foreasy HS Taq DNA Polymerase a’ leasachadh le Foregene, le bufair freagairt gun samhail, a ’dèanamh an uidheamachd seo le strì làidir agus co-chòrdalachd, agus faodaidh e deuchainn a dhèanamh gu dìreach air cleachdadh siostam Foregene Lysis mar theamplaid.Faodaidh an uidheamachd seo tagradh a dhèanamh airson pasgan lorg searbhag niuclasach COVID-19 agus leasachadh uidheamachd lorg searbhag niuclasach bacteria pathogenic eile.
Faodaidh an cromag seo a bhith gu dìreach mar phàirt den toradh IVD, a ’cleachdadh gu furasta agus gu sgiobalta.Chan fheum e ach dearbhadh furasta, gun a bhith a 'leasachadh a-rithist.
Sònrachaidhean
500T, 50,000T
Co-phàirtean kit
| Susbaint Kit (siostam freagairt 20 μL) | IM-05111-02 | IM-05112-02 |
| 500 T | 50,000 T | |
| Foreasy Rverse Transcriptase (200 U/μL) | 50 μL×1 | 1 ml×5 |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase (5 u/μL) | 100 μL×1 | 1 ml×10 |
| 2 × RT-qPCR dìreachBufair | 1 mL × 5 | 500 mL × 1 |
| Teagasg | 1 | 1 |
Ceumannan Obrachaidh
A: Ullaich teamplaid agus reagent
1. Ullaich teamplaid RNA ullaichte (Thathas a 'moladh inneal sreath Kit Iomallach Foregene Total RNA a chleachdadh gus teamplaid RNA a thoirt a-mach agus a ghlanadh) no sampall de thoradh sgàineadh (Thathas a' moladh siostam Foregene Lysis a chleachdadh), primers sònraichte (10 μM) agus stuthan consum iomchaidh eile, ionnstramaid.
2. Cuir am bufair 2 × Direct RT-qPCR, ddH2O gun RNase agus 20 × ROX Reference Dye (ma tha feum air) sa bhogsa le deigh, a’ toirt orra leaghadh gu nàdarrach, agus measgachadh gu socair.
B: Ullaich siostam RT-qPCR
Faigh leth de bhufair ath-bhualadh siostam ath-bhualadh (mar eisimpleir, ma tha meud an t-siostaim 20 μL, feumaidh e 10 μL 2 × Bufair RT-qPCR dìreach fhaighinn). Airsonsuim co-fhreagarrach de enzyme, tha sinn a 'moladh sinM-MLV: siostam freagairt 10-30 U / 20 μL,ThacDNA polymerase:Siostam ath-bhualadh 1-2 U / 20 μLis e seo ar moladh, bu chòir dhut a dhearbhadh agus atharrachadh), cuir teamplaid RNA, primers sònraichte agus probes, agus cuir ddH gun RNase ris2O gu 20 μL.Faodar iomradh a thoirt air ullachadh sònraichte siostam freagairt RT-qPCR chun chlàr 1 a leanas.
Clàr 1: Ullaich siostam RT-qPCR
| Comh-phàirt | Toirt | Co-chruinneachadh deireannach |
| 2 × Bufair RT-qPCR dìreach | 10 μL | 1 × |
| Tar-sgrìobhadh Foreasy Reverse (MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase | 1-2 U | |
| Air adhart Primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Reverse Primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Sgrùdadh (4 μM) | 1 µL | 200nM |
| Teamplaid (RNA no Lysate) | X l | |
| Dath iomraidh 20 × ROX | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Meud iomlan | 20 μL |
Nota: Tha Forward Primer agus Reverse Primer nam prìomhairean sònraichte de ghine targaid.Dh’ fhaodadh siostam an qPCR atharrachadh a rèir modalan practaigeach deuchainneach agus PCR.Tha sinn a’ moladh 400nM airson an cruinneachadh mu dheireadh den mhòr-chuid de phrìomhairean.Atharraich an àireamh de primers agus probes sònraichte a rèir an dùmhlachd ullaichte agus an dùmhlachd deireannach a thathar a’ moladh, mas e do thoil e.
1 *: Tagh dùmhlachd deireannach iomchaidh de ROX Reference Dye a rèir diofar ionnstramaidean cainneachdail PCR.Tha an cruinneachadh ROX Reference Dye as fheàrr de dh’ ionnstramaidean cainneachdail PCR ri fhaicinn sa chlàr a leanas:
| Innealan PCR cainneachdail | An dùmhlachd deireannach de ROX Reference Dye |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/Ceum a h-Aon,etc. | 1 × (mar eisimpleir, cuir 1μl 20 × ROX Reference Dye ann an siostam freagairt 20 μL) |
| ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P, Mx3005P agus Mx4000, msaa. | 0.5 × (mar eisimpleir, cuir 0.5μl 20 × ROX Reference Dye ann an siostam freagairt 20 μL) |
| Ionnsramaid Roche PCR, ionnstramaid PCR Bio-Rad, ionnstramaid PCR cainneachdail Eppendorf, msaa. | Às aonais ROX Reference Dye |
Stòradh agus beatha sgeilp
Bu chòir am pasgan a stòradh aig -20 ± 5 ℃.Bu chòir a stòradh sa bhad ann an -20 ℃ thermostatic refrigerator.Is e an ùine dligheachd 2 bhliadhna ma thèid a stòradh ann an staid iomchaidh.
