duilleag_bratach

Cell Iomlan RNA Kit Iomallach

Tuairisgeul Kit:

Saor bho RNase

Ag obair aig teòthachd an t-seòmair (15-25 ℃)

Le Colbh glanaidh DNA

Toradh àrd RNA

Fast: Cuir crìoch air às-tharraing ann an 11 mionaidean

Sàbhailteachd: Gun cheimigeach organach

neart a sheachnadh


  • :
  • Mion-fhiosrachadh toraidh

    Bathar Tags

    Ceistean Cumanta

    Tuairisgeul

    Bidh an uidheamachd seo a’ cleachdadh a’ cholbh snìomh agus an fhoirmle a chaidh a leasachadh le Foregene, a dh’ fhaodas RNA iomlan fìor-ghlan agus àrd-inbhe a thoirt a-mach à ceallan air an àiteachadh ann am pleitean 96, 24, 12, agus 6-tobar.

    Tha an cromag a’ toirt seachad Colbh Glanadh DNA èifeachdach, a dh’ fhaodas an supernatant agus an lysate cealla a sgaradh gu furasta, DNA genomic a cheangal agus a thoirt air falbh.Tha an obrachadh sìmplidh agus sàbhalaidh ùine.

    Tfaodaidh an Colbh RNA a-mhàin RNA a cheangal gu h-èifeachdach le foirmle gun samhail.Faodar àireamh mhòr de shamhlaichean a phròiseasadh aig an aon àm.

    Co-phàirtean kit

    Co-sgrìobhadh Kit RE-03111 RE-03114
    50 T 200 T
    Bufair cRL1* 25 ml 100 ml
    Bufair cRL2 15 ml 60 ml
    Bufair RW1* 25 ml 100 ml
    Bufair RW2 24 ml 96 ml
    RNase-Free ddH2O 10 ml 40 ml
    RNA - Colbh a-mhàin 50 200
    Colbh glanaidh DNA 50 200
    Teagasg 1 1

    * Feuch an caith thu miotagan agus gabh ceumannan dìon rè an obrachaidh oir tha salainn chaotropic iriosal ann am Buffer cRL1 agus Buffer RW1.

    Feartan & buannachdan

    ■ Tha am pròiseas air fad air obrachadh aig teòthachd an t-seòmair (15-25 ℃), às aonais amar deigh agus centrifugation aig teòthachd ìosal.
    ■ Tha an t-inneal gu lèir Saor bho RNase, cha leig thu leas dragh a bhith ort mu thruailleadh RNA.
    ■ Tha Colbh Glanadh DNA a’ ceangal DNA gu sònraichte, gus an urrainn don phasgan truailleadh DNA genomic a thoirt air falbh gun DNase a bharrachd a chuir ris.
    ■ Toradh RNA àrd: Faodaidh Colbh RNA a-mhàin agus foirmle gun samhail RNA a ghlanadh gu h-èifeachdach.
    ■ Astar luath: furasta obrachadh agus faodar a chrìochnachadh ann an 11 mionaidean.
    ■ Sàbhailteachd: Chan eil feum air reagent organach.
    ■ Càileachd àrd: Tha an RNA fìor-ghlan de fhìor-ghlan, saor bho phròtain agus neo-chunbhalachd eile, agus faodaidh e coinneachadh ri diofar dheuchainnean às deidh sin.

    buannachdan bho inneal aonaranachd RNA foregene

    Iarrtas Kit

    Tha e freagarrach airson RNA iomlan a thoirt a-mach agus a ghlanadh bho cheallan cultarach ann am pleitean 96, 24, 12, agus 6-tobar.

    Sruth obrach

    RNA iomlan cealla

    Diagram

    Cell Iomlan RNA Kit Iomallach Sruth-obrach1

    Dhèilig an diagram bataraidh gel agarose de Kit Iomallach Iomlan RNA Cell ris na h-àireamhan eadar-dhealaichte de cheallan gu h-àrd, elution tomhas-lìonaidh 20μl, gabh 2μl làn-ghlan RNA 1%.

    Stòradh agus beatha sgeilp

    Faodar an uidheamachd a stòradh airson 12 mìosan aig teòthachd an t-seòmair (15-25 ℃) no 2-8 ℃ airson ùine nas fhaide (24 mìosan).

    Faodar bufair cRL1 a stòradh aig 4 ℃ airson 1 mìos às deidh dha 2-hydroxy-1-ethanethiol (roghainneil) a chur ris.


  • Roimhe:
  • Air adhart:

  • Chan eil RNA air a thoirt a-mach no tha toradh RNA ìosal

    Gu tric bidh grunn nithean ann a bheir buaidh air èifeachdas ath-bheothachaidh, leithid: sampall clò susbaint RNA, dòigh-obrach, tomhas elution, msaa.

    1. Chaidh centrifugation bath deighe no cryogenic (4 °C) a dhèanamh rè obrachadh.

    Moladh: Obraich aig teòthachd an t-seòmair (15-25 ° C) tron ​​​​phròiseas gu lèir, na dèan amar deigh agus centrifuge aig teòthachd ìosal.

    2. Glèidhteachas sampall neo-iomchaidh no cus ùine stòraidh sampall.

    Moladh: Glèidh sampallan aig -80 ° C no reothadh ann an naitridean leaghan agus seachain cleachdadh reothadh is leaghaidh;feuch ri clò ùr no ceallan cultarach a chleachdadh airson às-tharraing RNA.

    3. Gu leòr sampall lysis.

    Moladh: Nuair a bhios tu a’ dèanamh homogenizing clò, dèan cinnteach gu bheil am maothran homogenized gu leòr agus gu bheil na ceallan maothraidh air an sgoltadh gu leòr gus sgaoileadh RNA a mhìneachadh.

    4. Cha 'n 'eil an t-eluent air a chur ris gu ceart.

    Moladh: Dearbhaich gu bheil RNase-Free ddH2Tha O air a chur ris dropwise gu meadhan membran a’ cholbh glanaidh.

    5. Cha deach an tomhas ceart de làn ethanol a chur ri Buffer RL2 no Buffer RW2.

    Moladh: Lean an stiùireadh, cuir an tomhas ceart de làn ethanol gu Buffer RL2 agus Buffer RW2 agus measgachadh gu math mus cleachd thu am pasgan.

    6. Chan eil dosage sampall meitabileach iomchaidh.

    Moladh: Cleachd 10-20 mg de stuth clò no (1-5) × 106ceallan gach 500 μl bufair RL1, oir faodaidh cus cleachdadh maothran leantainn gu lughdachadh RNA às-tharraing.

    7. Meud elution neo-choileanta no elution neo-choileanta.

    Moladh: Is e meud elution a’ cholbh glanaidh 50-200 μl;mura h-eil a’ bhuaidh elution riarachail, thathas a’ moladh an ùine suidheachaidh teòthachd an t-seòmair a leudachadh às deidh dha ddH RNase-Free a chuir ris2O, me airson 5-10 min.

    8.Tha fuigheall ethanol aig a’ cholbh glanaidh às deidh nighe Buffer RW2.

    Moladh: Ma tha fuigheall ethanol ann às deidh nighe Buffer RW2, centrifugation tiùb falamh airson 1min, faodar an ùine airson obrachadh centrifugation tiùb falamh àrdachadh gu 2min, no faodar an colbh glanaidh a chuir aig teòthachd an t-seòmair airson 5 mionaidean gus an còrr a thoirt air falbh gu h-iomchaidh. ethanol.

    Tha RNA puraichte air a dhol sìos

    Tha càileachd an RNA fìor-ghlan co-cheangailte ri factaran leithid gleidheadh ​​​​an sampall, truailleadh RNase, agus làimhseachadh, msaa.

    1. Chan eil sampallan clò-bhualaidh air an cumail ann an ùine.

    Moladh: Mura tèid sampallan clò no ceallan a chleachdadh ann an deagh àm às deidh an cruinneachadh, sa bhad cryopreserve aig -80 ° C no nitrogen leaghaidh.Gus RNA a thoirt a-mach, cleachd sampall clò no cealla a chaidh a thogail às ùr nuair as urrainnear.

    2. Reothadh a-rithist agus a 'leaghadh shampaill clò.

    Moladh: Nuair a bhios tu a’ stòradh sampallan clò, tha e nas fheàrr an gearradh ann am pìosan beaga airson an glèidheadh, agus aon de na pìosan a thoirt air falbh nuair a bhios iad gan cleachdadh gus nach tèid an sampall a reothadh a-rithist agus a bhith a’ truailleadh RNA.

    3. Tha RNase air a thoirt a-steach no gun a bhith a’ caitheamh miotagan cuidhteasach, aghaidhean choimheach, msaa rè an obrachaidh.

    Moladh: Tha e nas fheàrr deuchainnean às-tharraing RNA a dhèanamh ann an seòmraichean làimhseachaidh RNA air leth agus tha am bòrd air fhuadach ron deuchainn.

    Caith miotagan agus aghaidhean choimheach tron ​​​​deuchainn gus lughdachadh RNA air adhbhrachadh le toirt a-steach RNase a lughdachadh.

    4. Tha ath-bheachdan air an truailleadh le RNase rè cleachdadh.

    Moladh: Cuir pasgan Iomallach RNA Iomlan Ainmhidhean na àite airson deuchainnean co-cheangailte.

    5. Tha na tiùban centrifuge, molaidhean, msaa a thathar a 'cleachdadh ann an làimhseachadh RNA air an truailleadh le RNase.

    Moladh: Dearbhaich gu bheil na tiùban centrifuge, molaidhean, pìoban, msaa a thathas a’ cleachdadh ann an às-tharraing RNA uile saor bho RNase.

    Bidh RNA puraichte a gheibhear a’ toirt buaidh air deuchainnean sìos an abhainn

    Bidh RNA air a ghlanadh leis a’ cholbh glanaidh, ma tha na h-ianan salainn, susbaint pròtain ro mhòr a’ toirt buaidh air an deuchainn sìos an abhainn, leithid: tar-sgrìobhadh air ais, Northern Blot et al.

    1. Tha fuigheall ion-salainn aig an RNA a tha air fhuasgladh.

    Moladh: Dearbhaich gu bheil an tomhas ceart de ethanol air a chur ri Buffer RW2 agus dèan 2 nighe colbh glanaidh aig an astar ceud-ghluasadach a tha air a chomharrachadh airson obrachadh;ma tha fuigheall ian salainn ann, fàg an colbh glanaidh gu Buffer RW2 airson 5 mionaidean aig teòthachd an t-seòmair agus dèan centrifugation gus an tèid truailleadh salainn a thoirt air falbh.

    2. Fuigheall ethanol ann an RNA elutioned.

    Moladh: Dearbhaich, às deidh nighe bufair RW2, gun dèan thu an obair centrifugation tiùb falamh aig an astar centrifugation a tha air a chomharrachadh airson obrachadh, àrdaich ùine gnìomhachd centrifugation tiùb falamh gu 2 min ma tha fuigheall ethanol ann fhathast, no fàg e aig teòthachd an t-seòmair airson 5 m

    Sgrìobh do theachdaireachd an seo agus cuir thugainn e