Pròtacal PCR kit-UNG dìreach (às aonais innealan samplachaidh).
Tuairisgeulan
Bidh an uidheamachd seo a’ cleachdadh siostam bufair lysis sònraichte gus DNA genomic a leigeil ma sgaoil gu sgiobalta bho shamhlaichean clò bheathaichean airson ath-bheachdan PCR, agus mar sin tha e gu sònraichte freagarrach airson deuchainnean ginteil air sgèile mhòr.
Tha am pròiseas airson DNA genomic a leigeil ma sgaoil bhon bhufair lysis air a chrìochnachadh taobh a-staigh 10-30 mionaidean aig 65 ° C.Chan eil feum air pròiseasan sam bith eile leithid toirt air falbh pròtain agus RNA, agus faodar an lorg DNA a chaidh a leigeil ma sgaoil a chleachdadh mar theamplaid airson freagairt PCR.
2 × PCR furastaTMBidh Mix (UNG) a’ cleachdadh dUTP an àite dTTP air bunait 2 × PCR EasyTMMeasgaich, agus cuir ris enzyme UNG (Uracil-N-glycosylase) as urrainn an teamplaid anns a bheil dUTP a lughdachadh aig an aon àm.Ron ath-bhualadh PCR, thathas a’ cleachdadh an enzyme UNG gus an toradh PCR anns a bheil uracil a lughdachadh.Cha bhith buaidh sam bith aig an enzym UNG air an teamplaid anns nach eil uracil, mar sin a’ dèanamh cinnteach gu bheil sònrachas agus neo-mhearachdachd an leudachaidh agus a chuireas casg air truailleadh thoraidhean PCR rè deuchainnean ginteil air sgèile mhòr.
Tha D-Taq DNA polymerase na DNA polymerase a chaidh a leasachadh gu sònraichte le Foregene airson ath-bheachdan dìreach PCR.Tha fulangas làidir aig D-Taq DNA polymerase ri measgachadh de luchd-dìon ath-bhualadh PCR, agus is urrainn dhaibh meudan lorg DNA àrdachadh gu h-èifeachdach ann an grunn shiostaman freagairt iom-fhillte, agus faodaidh astar an leudachaidh ruighinn 2Kb / min, a tha gu sònraichte freagarrach airson freagairt dìreach PCR.
Co-phàirtean kit
Pàirt I | Bufair AL |
Protease saor an asgaidh | |
6 × Bufair luchdachadh DNA | |
Pàirt II | 2 × PCR furastaTMMeasg (UNG) |
Feartan & buannachdan
■Chan eil glanadh DNA daor agus ùineail
■ Tha an t-iarrtas sampall beag, cho beag ri 5mg de stuth beathach a ghabhas deuchainn.
■ Chan eil feum air làimhseachadh sònraichte leithid bleith is pronnadh, agus tha an obrachadh sìmplidh.
■ Tha siostam PCR leasaichte a’ fàgail gu bheil sònrachas nas àirde aig PCR agus fulangas nas làidire do luchd-bacadh ath-bhualadh PCR.
■ Siostam PCR an-aghaidh truailleadh 2×PCR furastaTMBidh Mix (UNG) gu h-èifeachdach a’ cuir às don truailleadh a dh’ adhbhraicheas toraidhean PCR agus a’ dèanamh cinnteach à sònrachas agus mionaideachd leudachaidh.
Paramadairean kit
Iarrtas: measgachadh de stuthan beathach.
DNA air a leigeil ma sgaoil bho shampall lysis: air a chleachdadh mar theamplaid PCR a-mhàin.
Faodar an uidheamachd a chleachdadh airson na h-adhbharan a leanas: comharrachadh transgenosis, genotyping bheathaichean, msaa.
Sruth obrach
Stòradh agus beatha sgeilp
Bu chòir pàirt I den chromag seo a bhith air a stòradh aig 2-8℃.
Faodar an reagent Buffer AL a stòradh airson 12 mìosan fo chumhachan tioram;faodar a stòradh aig 2-8℃airson stòradh nas fhaide.
Tha foirmle sònraichte aig Reagent Foregene Protease.Gus dèanamh cinnteach à gnìomhachd agus seasmhachd, feuch an glèidh thu e aig 4℃airson 12 mìosan.
Reagent 6×Faodar bufair luchdachadh DNA a stòradh aig 4℃no -20℃airson ùine mhòr.
Bu chòir Pàirt II den phasgan seo a stòradh aig -20℃.
Reagent 2×PCR furastaTMMix(UNG), ma thèid a chleachdadh gu tric, faodar a stòradh aig 4 cuideachd℃airson stòradh geàrr-ùine (cleachd suas taobh a-staigh 10 latha).