Kit Iomlan Iomlan RNA Ainmhidhean Innealan Iomlan às-tharraing agus glanaidh RNA airson feòil bheathaichean & cealla
Tuairisgeul Kit:
Thoir a-mach gu sgiobalta agus gu h-èifeachdach RNA iomlan fìor-ghlan agus àrd-inbhe bho dhiofar stuthan beathach.
Cha leig thu leas a bhith draghail mu chrìonadh RNA.Tha an siostam gu lèir saor bho RNase
Thoir air falbh DNA gu h-èifeachdach a’ cleachdadh Colbh Glanadh DNA
Thoir air falbh DNA gun a bhith a 'cur DNA ris
Simple - tha a h-uile gnìomh air a chrìochnachadh aig teòthachd an t-seòmair
Fast - faodar obrachadh a chrìochnachadh ann an 30 mionaid
Sàbhailte - chan eil imrich organach air a chleachdadh
Glanachd àrd - OD260/280≈1.8-2.1
Tuairisgeul Kits
50 Preps, 200 Preps
Bidh am pasgan seo a’ cleachdadh ancolbh snìomh agus foirmleair a leasachadh leis a’ chompanaidh againn, as urrainn RNA iomlan fìor-ghlan agus àrd-inbhe a thoirt a-mach à diofar stuthan beathach le àrd-èifeachdas.It a ’toirt seachad Colbh glanaidh DNA èifeachdach, a dh’ fhaodas DNA genomic a sgaradh agus a shanasachadh gu furasta bhon lysate supernatant agus clò, sìmplidh agus sàbhalaidh ùine;Faodaidh Colbh RNA a-mhàin RNA a cheangal gu h-èifeachdach agus faodar a phròiseasadh aig an aon àm le foirmle sònraichte Tòrr de shamhlaichean.
Tha an siostam gu lèir saor bho RNase, gus nach bi an RNA a chaidh a thoirt a-mach air a thruailleadh;Bufair RW1, siostam nighe bufair Buffer RW2, gus am bi an RNA a gheibhear saor bho phròtain, DNA, ian, agus truailleadh todhar organach.
Co-phàirtean kit
| Kit Iomallach RNA Iomlan bheathaichean | ||
| Co-phàirtean kit | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 T | 200 T | |
| Bufair RL1* | 25 ml | 100 ml |
| Bufair RL2 | 15 ml | 60 ml |
| Bufair RW1* | 25 ml | 100 ml |
| Bufair RW2 | 24 ml | 96 ml |
| RNase-Free ddH2O | 10 ml | 40 ml |
| Colbh RNA a-mhàin | 50 | 200 |
| Colbh glanaidh DNA | 50 | 200 |
| Leabhar-làimhe stiùiridh | 1 phìos | 1 phìos |
Fiosrachadh toraidh
| Cruth | Colbh snìomh | Co-phàirt purnaidh | Colbh Foregene, reagent |
| Fliuch | 1-24 sampall | Uair airson ullachadh | ~ 30 mion (24 sampall) |
| Centrifuge | Centrifuge air an deasg | Dealachadh pyrolysis | Centrifugal dealachadh |
| Sampall | Sgeadachadh bheathaichean;cealla | Meud eisimpleirean | Meud stuth: 10-20 mg;cealla:(1-5)×106 |
| Meud elution | 50-200 μL | Meud luchdachadh as àirde | 850 μL |
Feartan & buannachdan
■ Cha leig thu leas a bhith draghail mu chrìonadh RNA;tha an siostam gu lèir saor bho RNase
■ Thoir air falbh gu h-èifeachdach DNA-cleachdadh DNA-Colbh Glanadh
■ Thoir air falbh DNA gun a bhith a’ cur DNase ris
■ Sìmplidh - tha a h-uile gnìomh air a chrìochnachadh aig teòthachd an t-seòmair
■ Fast -operation faodar a chrìochnachadh ann an 30 mionaid
■ Sàbhailte - chan eil feum air reagent organach
■ Àrd purity -OD260/280≈1.8-2.1
Iarrtas kit
Tha e freagarrach airson a bhith a’ toirt a-mach agus a’ glanadh RNA iomlan bho ghrunn stuthan beathach ùr no reòta no ceallan cultarach.
Paramadairean toraidh
■ Iarrtasan sìos an abhainn: synthesis cDNA ciad-shreath, RT-PCR, clonadh moileciuil, Northern Blot, msaa.
■ Samhlaidhean: nèapraigean bheathaichean, ceallan cultarach
■ Dosage: Fìnean 10-20mg, ceallan (2-5) × 106
■ Comas ceangail DNA as àirde de cholbh glanaidh: 80 μg
■ Elution volume: 50-200 μl
Diagram
Kit Iomallach Iomlan RNA beathach air a làimhseachadh 20mg
Samhlaidhean luchag ùr, gabh 5% làn-ghlan RNA 1% agar
Electrophoresis Glycogel
1: Spleen 2: Duanag
3: An grùthan 4: Cridhe
Stòradh agus beatha sgeilp
Faodar am pasgan a stòradh airson 24 mìosan aig teòthachd an t-seòmair (15-25 ℃) no 2-8 ℃ airson ùine nas fhaide.Faodar bufair RL1 a stòradh aig 4 ℃ airson 1 mìos às deidh dha β- mercaptoethanol (roghainneil).
Artaigilean air an ainmeachadh
1.Ma tha: 18.808:Zheng, Q., Qin, F., Luo, R., et al.Nanoparticles coltach ri Lipid air a luchdachadh le mRNA airson deasachadh bunait grùthan tro bhith a’ leasachadh dealbhadh meadhanach measgaichte.Adv.Gnìomh.Màthair.2021, 31, 2011068.doi: 10.1002/adfm.202011068.
2.Ma tha: 18.187:Tha e X, Hong W, Yang J, et al.Bidh apoptosis gun spionnadh de cheallan ann an ullachadh bun-cheallan teirpeach a’ toirt buaidh immunomodulatory tro bhith a’ leigeil ma sgaoil phosphatidylserine.Targaid tar-chuir comharran Anr.2021 14 Iuchar; 6(1): 270.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.Àirde: 17.97:Dai Z, Liu H, Liao J, et al.Bidh atharrachadh tRNA N7-Methylguanosine a’ neartachadh eadar-theangachadh mRNA oncogenic agus a’ brosnachadh adhartas cholangiocarcinoma intrahepatic.Mol Cell.2021 Iuchar 29:S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.Àirde: 9.225:Cao X, Shu Y, Chen Y, et al.Mion-atharrachadh Mettl14-M6A a’ cuideachadh le ath-nuadhachadh grùthan le bhith a’ cumail suas homeostasis reticulum endoplasmic.Cell Mol Gastroenterol Hepatol.2021; 12(2):633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
Innealan isoaltion RNA airson stòran sampall eilerim faighinn:
Cell, lus, viral, fuil, msaa.
Chan eil RNA air a thoirt a-mach no tha toradh RNA ìosal
Gu tric bidh grunn nithean ann a bheir buaidh air èifeachdas ath-bheothachaidh, leithid: sampall clò susbaint RNA, dòigh-obrach, tomhas elution, msaa.
1. Chaidh centrifugation bath deighe no cryogenic (4 °C) a dhèanamh rè obrachadh.
Moladh: Obraich aig teòthachd an t-seòmair (15-25 ° C) tron phròiseas gu lèir, na dèan amar deigh agus centrifuge aig teòthachd ìosal.
2. Glèidhteachas sampall neo-iomchaidh no cus ùine stòraidh sampall.
Moladh: Glèidh sampaill aig -80 ° C no reothadh ann an naitridean leaghan agus seachain cleachdadh reothadh is leaghaidh;feuch ri clò ùr no ceallan cultarach a chleachdadh airson às-tharraing RNA.
3. Gu leòr sampall lysis.
Moladh: Nuair a bhios tu a’ dèanamh homogenizing clò, dèan cinnteach gu bheil am maothran homogenized gu leòr agus gu bheil na ceallan maothraidh air an sgoltadh gu leòr gus sgaoileadh RNA a mhìneachadh.
4. Cha 'n 'eil an t-eluent air a chur ris gu ceart.
Moladh: Dearbhaich gu bheil RNase-Free ddH2Tha O air a chur ris dropwise gu meadhan membran a’ cholbh glanaidh.
5. Cha deach an tomhas ceart de làn ethanol a chur ri Buffer RL2 no Buffer RW2.
Moladh: Lean an stiùireadh, cuir an tomhas ceart de làn ethanol gu Buffer RL2 agus Buffer RW2 agus measgachadh gu math mus cleachd thu am pasgan.
6. Chan eil dosage sampall meitabileach iomchaidh.
Moladh: Cleachd 10-20 mg de stuth clò no (1-5) × 106ceallan gach 500 μl bufair RL1, oir faodaidh cus cleachdadh maothran leantainn gu lughdachadh RNA às-tharraing.
7. Meud elution neo-choileanta no elution neo-choileanta.
Moladh: Is e meud elution a’ cholbh glanaidh 50-200 μl;mura h-eil a’ bhuaidh elution riarachail, thathas a’ moladh an ùine suidheachaidh aig teòthachd an t-seòmair a leudachadh às deidh dha RNase-Free ddH a chur ris2O, me airson 5-10 min.
8.Tha fuigheall ethanol aig a’ cholbh glanaidh às deidh nighe Buffer RW2.
Moladh: Ma tha fuigheall ethanol ann às deidh nighe Buffer RW2, centrifugation tiùb falamh airson 1min, faodar an ùine airson obrachadh centrifugation tiùb falamh àrdachadh gu 2min, no faodar an colbh glanaidh a chuir aig teòthachd an t-seòmair airson 5 mionaidean gus an ethanol fuigheall a thoirt air falbh gu h-iomchaidh.
Tha RNA puraichte air a dhol sìos
Tha càileachd an RNA fìor-ghlan co-cheangailte ri factaran leithid gleidheadh an sampall, truailleadh RNase, agus làimhseachadh, msaa.
1. Chan eil sampallan clò-bhualaidh air an cumail ann an ùine.
Moladh: Mura tèid sampallan clò no ceallan a chleachdadh ann an deagh àm às deidh an cruinneachadh, sa bhad cryopreserve aig -80 ° C no nitrogen leaghaidh.Gus RNA a thoirt a-mach, cleachd sampall clò no cealla a chaidh a thogail às ùr nuair as urrainnear.
2. Reothadh a-rithist agus a 'leaghadh shampaill clò.
Moladh: Nuair a bhios tu a’ stòradh sampallan clò, tha e nas fheàrr an gearradh ann am pìosan beaga airson an glèidheadh, agus aon de na pìosan a thoirt air falbh nuair a bhios iad gan cleachdadh gus casg a chuir air reothadh an t-sampall a-rithist agus truailleadh RNA.
3. Tha RNase air a thoirt a-steach no gun a bhith a’ caitheamh miotagan cuidhteasach, aghaidhean choimheach, msaa rè an obrachaidh.
Moladh: Tha e nas fheàrr deuchainnean às-tharraing RNA a dhèanamh ann an seòmraichean làimhseachaidh RNA air leth agus tha am bòrd air fhuadach ron deuchainn.
Cleachd miotagan agus aghaidhean choimheach tron deuchainn gus lughdachadh RNA air adhbhrachadh le toirt a-steach RNase a lughdachadh.
4. Tha ath-bheachdan air an truailleadh le RNase rè cleachdadh.
Moladh: Cuir pasgan Iomallach RNA Iomlan Ainmhidhean na àite airson deuchainnean co-cheangailte.
5. Tha na tiùban centrifuge, molaidhean, msaa a thathar a 'cleachdadh ann an làimhseachadh RNA air an truailleadh le RNase.
Moladh: Dearbhaich gu bheil na tiùban centrifuge, molaidhean, pìoban, msaa a thathas a’ cleachdadh ann an às-tharraing RNA uile saor bho RNase.
Bidh RNA puraichte a gheibhear a’ toirt buaidh air deuchainnean sìos an abhainn
Bidh RNA air a ghlanadh leis a’ cholbh glanaidh, ma tha na h-ianan salainn, susbaint pròtain ro mhòr a’ toirt buaidh air an deuchainn sìos an abhainn, leithid: tar-sgrìobhadh air ais, Northern Blot et al.
1. Tha fuigheall ion-salainn aig an RNA a tha air fhuasgladh.
Moladh: Dearbhaich gu bheil an tomhas ceart de ethanol air a chur ri Buffer RW2 agus dèan 2 nighe colbh glanaidh aig an astar ceud-ghluasadach a tha air a chomharrachadh airson obrachadh;ma tha fuigheall ian salainn ann, fàg an colbh glanaidh gu Buffer RW2 airson 5 min aig teòthachd an t-seòmair agus dèan centrifugation gus an tèid truailleadh salainn a thoirt air falbh.
2. Fuigheall ethanol ann an RNA elutioned.
Moladh: Dearbhaich, às deidh nighe bufair RW2, gun dèan thu an obair centrifugation tiùb falamh aig an astar ceud-ghluasadach a tha air a chomharrachadh airson obrachadh, àrdaich ùine gnìomhachd centrifugation tiùb falamh gu 2 min ma tha fuigheall ethanol ann fhathast, no fàg e aig teòthachd an t-seòmair airson 5 mionaidean às deidh an centrifugation tiùb falamh gus an ìre as àirde a thoirt air falbh fuigheall ethanol.
