Kit RT-qPCR dìreach
Tuairisgeul
Bidh Kit RT-qPCR dìreach a’ toirt seachad bufair RT-qPCR air a phacadh air leth agus enzyme àrd èifeachdachmeasgachadh (Taq 、 M-MLV , RI ), ga dhèanamh goireasach airson a bhith a 'cruthachadh innealan cùl-taic agus siostamrèiteachadh, taobh a-staigh dearbhadh sìmplidh.
Sònrachaidhean
500T, 50,000T
Co-phàirtean kit
Susbaint Kit (siostam freagairt 20 μL) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
500 T | 50,000 T | |
Measgachadh Enzyme dìreach | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
2 × Bufair RT-qPCR dìreach | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
Teagasg | 1 | 1 |
Ceumannan Obrachaidh
Mus tèid ath-bheachdan ullachadh, bu chòir na h-ath-bheachdan uile anns a 'phiseag a bhith air an leaghadh aig teòthachd an t-seòmair agus air a mheasgachadh gu socair.
A: Ullaich of teamplaid agus reagent
1. Ullaich teamplaid RNA ullaichte (Thathas a 'moladh inneal sreath Kit Iomallach Foregene Total RNA a chleachdadh gus teamplaid RNA a thoirt a-mach agus a ghlanadh) no sampall de thoradh sgàineadh (Thathas a' moladh siostam Foregene Lysis a chleachdadh), primers sònraichte (10 μM) agus stuthan consum iomchaidh eile, ionnstramaid.
2. Cuir am Bufair RT-qPCR dìreach 2 ×, ddH2O gun RNase agus 20 × ROX Reference Dye (ma tha's a dhìth) anns a’ bhogsa le deigh, a’ toirt orra leaghadh gu nàdarrach, agus measgachadh gu socair.
B: Ullaich of RT-qPCR siostam
Clàr 1 : Ullaich of RT-qPCR seustam
Comh-phàirt | Toirt | Co-chruinneachadh deireannach |
2 × Bufair RT-qPCR dìreach | 10 μL | 1 × |
Measgachadh Enzyme dìreach | 1μL | |
Air adhart Primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
Reverse Primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
Sgrùdadh (4 μM) | 1μL | 200nM |
Teamplaid (RNA no Lysate) | X l | |
Dath fiosrachaidh 20 × ROX | - | 1* |
RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
Meud iomlan | 20μL |
C: Suidhich an RT-qPCR ath-bhualadh prògram
Clàr 2 : RT-qPCR reaction prògram suidheachadh (airson eisimpleir: dhà-ceum dòigh-obrach)
Ceum | Teòthachd | Uair | Rothaichean | Susbaint | |
1 | 50 ℃ | 15 mion | 1* | 1 | Ath-sgrìobhadh air ais |
2 | 95 ℃ | 1 mhionaid | 1 | Ro-dhiadhachadh | |
3 | 95 ℃ | 10 diog | 40-45 | Dì-nàdarachadh | |
60 ℃ | 30 diog 2* | Anneal/Leudachadh |
Stòradh agus beatha sgeilp
-Bu chòir an cromag a stòradh aig -20± 5℃.Is e an ùine dligheachd 12 mìosan.
- Seachain ath-chuairtean reothadh-loisgte (<5 cearcallan).