Pasgan Iomallach DNA Cairt Buccal Swab/FTA Tarraing DNA genomic no pasgan glanaidh bho swaban buccal
Tuairisgeul Kit:
Glan gu sgiobalta DNA genomic àrd-inbhe bho swab buccal / sampallan Cairt FTA.
◮Gun truailleadh RNase:Tha an Colbh DNA-a-mhàin a bheir an uidheamachd seachad ga dhèanamh comasach an RNA a thoirt air falbh bhon DNA genomic gun RNase a chuir ris rè an deuchainn, a’ cur casg air an obair-lann bho bhith air a thruailleadh le RNase exogenous.
◮Astar luath:Tha gnìomhachd nas àirde aig Foregene Protease na proteases coltach ris, agus bidh e a’ cnàmh sampallan clò gu sgiobalta;tha an obrachadh sìmplidh, agus faodar an obair tarraing DNA genomic a chrìochnachadh taobh a-staigh 20-80 mionaidean.
◮Goireasach:Tha an centrifugation air a dhèanamh aig teòthachd an t-seòmair, agus chan eil feum air centrifugation aig teòthachd ìosal 4 ° C no sileadh ethanol de DNA.
◮Sàbhailteachd:Chan eil feum air às-tharraing organach reagent.
◮Àrd chàileachd:Tha mìrean mòra anns an DNA genomic a chaidh a thoirt a-mach, gun RNA, no RNase, agus susbaint ian gu math ìosal, a choinnicheas ri riatanasan diofar dheuchainnean.
◮Micro-elution siostam:Faodaidh e an dùmhlachd de DNA genomic a mheudachadh, a tha goireasach airson lorg no deuchainn sìos an abhainn.
Tuairisgeul
Tha an uidheamachd seo a’ toirt seachad dòigh èifeachdach is luath airson DNA genomic àrd-dùmhlachd fhaighinn bho swabs buccal agus Cairt FTA (spotan fala).A 'cleachdadh ar companaidh's gun samhail agus foirmle snìomh membran silica DNA a-mhàin, còmhla ri Foregene Protease, DNA genomic àrd-dùmhlachd àrd-inbhe a thoirt a-mach ann an 80 mionaid.Bidh an colbh glanaidh beag a chaidh a dhealbhadh gu sònraichte a’ ceangal DNA genomic, agus faodar an DNA a chuir às le tomhas beag (15μl) siostam elution gus dùmhlachd an DNA genomic a gheibhear a mheudachadh, a tha goireasach airson lorg no deuchainn sìos an abhainn.Faodaidh an uidheamachd aon no barrachd sampaill a phròiseasadh aig an aon àm, agus chan fheum am pròiseas glanaidh stuthan organach leithid phenol, cloroform, agus sileadh isopropanol no ethanol a bheir ùine seachad, agus tha an obrachadh sìmplidh agus sàbhalaidh ùine.
Sònrachaidhean
50 Ullamh
Co-phàirtean kit
| Bufair ST1 |
| Bufair ST2 |
| Acrylamide sreathach |
| Bufair PW |
| Bufair WB |
| Bufair EB |
| Protease saor an asgaidh |
| DNA-A-mhàin Colbh |
| Stiùiridhean |
Feartan & buannachdan
- Gun truailleadh RNase: Tha an Colbh DNA-a-mhàin a tha an cromag a’ toirt seachad ga dhèanamh comasach RNA a thoirt air falbh bho DNA genomic gun RNase a chuir ris rè an deuchainn, a’ seachnadh an obair-lann bho bhith air a thruailleadh le RNase exogenous.
-Astar luath: tha gnìomhachd nas àirde aig Foregene Protease na proteases coltach ris, a ’cnàmh sampallan gu sgiobalta;obrachadh sìmplidh.
-Convenient: Tha an centrifugation air a dhèanamh aig teòthachd an t-seòmair, agus chan eil feum air centrifugation aig teòthachd ìosal 4 ° C no sileadh ethanol de DNA.
- Sàbhailteachd: Chan eil feum air às-tharraing organach.
-Càileachd àrd: Tha mìrean mòra anns an DNA genomic a chaidh a thoirt a-mach, gun RNA, no RNase, agus susbaint ian gu math ìosal, a choinnicheas ri riatanasan diofar dheuchainnean.
-Siostam micro-elution: Faodaidh e an dùmhlachd de DNA genomic a mheudachadh, a tha goireasach airson lorg no deuchainn sìos an abhainn.
Iarrtas kit
Tha e freagarrach airson DNA genomic a ghlanadh bho na sampallan a leanas: swaban buccal, Cairt FTA (stallan fala).
Stòradh agus beatha sgeilp
-Faodar an cromag seo a stòradh airson 12 mìosan fo chumhachan tioram aig teòthachd an t-seòmair (15-25 ° C);ma dh'fheumas e a bhith air a stòradh airson ùine nas fhaide, faodar a stòradh aig 2-8 ° C.
Nota: Ma thèid a stòradh aig teòthachd ìosal, tha am fuasgladh buailteach do fhrasadh.Mus tèid a chleachdadh, dèan cinnteach gun cuir thu am fuasgladh anns a 'phiseag aig teòthachd an t-seòmair airson ùine.Ma tha feum air, preheat e ann an amar uisge 37 ° C airson 10 mionaidean gus an sileadh a sgaoileadh, agus measgachadh e mus cleachd thu e.
-Tha foirmle sònraichte aig fuasgladh Foregene Protease, a tha gnìomhach nuair a thèid a stòradh aig teòthachd an t-seòmair airson ùine mhòr (3 mìosan);bidh a ghnìomhachd agus a sheasmhachd nas fheàrr nuair a thèid a stòradh aig 4 ° C, agus mar sin thathas a’ moladh a stòradh aig 4 ° C, cuimhnich gun a bhith ga chumail aig -20 ° C.
Tha an colbh glanaidh dùinte
Anns a ’phiseag seo, anns an obair às-tharraing DNA genomic, tha an colbh glanaidh air a shanasachadh gu dìreach air a’ mheasgachadh enzymatic lysis gun cheum centrifugation, agus faodar an colbh glanaidh a bhacadh air sgàth enzymization neo-choileanta agus slaodachd àrd an t-sampall.
Tha na h-adhbharan a dh'fhaodadh a bhith ann mar a leanas:
1. Cnàmhadh enzymatic neo-choileanta de shamhlaichean clò.
Moladh: Faodar an ùine giollachd sampall de Foregene Protease a leudachadh gu h-iomchaidh no faodar an supernatant a thoirt às deidh centrifugation aig 12,000 rpm (~ 13,400 × g) airson 5 mion.
2. Cleachdadh cus de shamhlaichean clò no stuthan mòra.
Moladh: Tha e nas fheàrr gun a bhith nas àirde na 1 Buccal swab anns an sampall;ma tha an sampall ro mhòr, àrdaich an dòs de Buffer ST1, Foregene Protease, bufair ST2 a rèir sin.
3. Tha an viscosity sampall ro àrd.
Moladh: Faodar sampaill a lagachadh gu h-iomchaidh le 10 mM de Tris-HCl mus tèid DNA genomic a thoirt a-mach.
4. Tha pìosan den chairt-fala air an deoghal.
Moladh: Faodar an ùine centrifugation gluasadach de cheum 6 de tharraing genomic spot fala (Cairt FTA) a leudachadh gu h-iomchaidh.
Toradh ìosal no gun DNA
Gu tric bidh grunn nithean ann a bheir buaidh air toradh DNA genomic, a’ toirt a-steach tùs sampall, suidheachaidhean stòraidh sampall, ullachadh sampall, làimhseachadh, msaa.
Chan fhaighear DNA genomic aig àm às-tharraing
Tha na h-adhbharan a dh’ fhaodadh a bhith mar a leanas:
1. Bidh gleidheadh neo-iomchaidh de shamhlaichean no stòradh ro fhada a 'leantainn gu truailleadh DNA genomic.
Moladh: B’ fheàrr le swaban beòil a bhith air an samplachadh às ùr, agus chan eilear a’ moladh swaban glèidhte a chleachdadh airson obair às-tharraing DNA genomic;bu chòir sampallan spot fala dèanamh cinnteach gu bheil an càileachd barrantaichte agus cha bu chòir an ùine stòraidh a bhith ro fhada.
2. Chan fhaod cus cleachdadh clò a bhith mar thoradh air nach tèid an DNA genomic co-fhreagarrach a thoirt a-mach.
Moladh: Lean an stiùireadh samplachadh swab buccal anns an stiùireadh obrachaidh, agus sguab cho tric ‘s as urrainn gus an tèid ceallan gu leòr a cheangal ris an swab beòil airson às-tharraing DNA genomic;airson às-tharraing sampall spot fala, faodar an raon gearraidh spot fala àrdachadh gu h-iomchaidh.
3. Tha Foregene Protease air a ghleidheadh gu mì-fhreagarrach, a 'ciallachadh gu bheil lùghdachadh ann an gnìomhachd no neo-ghnìomhachd.
Moladh: Dearbhaich suidheachadh stòraidh an Foregene Protease no cuir Foregene Protease ùr na àite airson ath-bhualadh enzymatic.
4. Tha gleidheadh neo-iomchaidh air a 'phiseag no an ùine stòraidh ro fhada, a' ciallachadh gu bheil cuid de cho-phàirtean anns a 'chit a' fàilligeadh.
Moladh: Ceannaich pasgan aonaranachd DNA buccal swab airson modhan co-cheangailte.
5. Chan eil Buffer WB a' cur ethanol iomlan.
Moladh: Dearbhaich gu bheil bufair WB a’ cur ris an tomhas cheart de làn ethanol.
6. Chan eil an eluent air a chur gu ceart ris an fhilm silicone.
Moladh: Cuir boinneagan eluent ro-bhlàth 65 ° C gu meadhan an membran silicone agus fàg aig teòthachd an t-seòmair airson 5 mionaidean gus èifeachdas elution àrdachadh.
DNA genomic le toradh ìosal iomallach
Tha na h-adhbharan a dh'fhaodadh a bhith ann mar a leanas:
1. Bidh gleidheadh neo-iomchaidh de shamhlaichean no stòradh ro fhada a 'leantainn gu truailleadh DNA genomic.
Moladh: B’ fheàrr le swaban beòil a bhith air an samplachadh às ùr, agus cha bu chòir swaban glèidhte a chleachdadh airson às-tharraing DNA genomic.
2. Ma tha an àireamh de shampall clò ro bheag, bidh an susbaint DNA genomic a chaidh a thoirt a-mach nas lugha.
Moladh: Lean an stiùireadh samplachadh swab beòil anns an stiùireadh obrachaidh, a ’sguabadh cho tric‘ s a ghabhas gus an tèid ceallan gu leòr a cheangal ris an swab beòil airson às-tharraing DNA genomic.
3. Tha Foregene Protease air a ghleidheadh gu mì-fhreagarrach, a 'ciallachadh gu bheil lùghdachadh ann an gnìomhachd no neo-ghnìomhachd.
Moladh: Dearbhaich suidheachadh stòraidh an Foregene Protease no cuir Foregene Protease ùr na àite airson ath-bhualadh enzymatic.
4. Duilgheadasan eluent.
Moladh: Cleachd Buffer EB airson elution;ma chleachdas tu ddH2O no daoine eile, dearbhaich gu bheil pH an eluate eadar 7.0-8.5.
5. Chan eil an eluate air a chur ris gu ceart dropwise.
Moladh: Cuir boinneagan eluent gu meadhan an membran silicone agus fàg aig teòthachd an t-seòmair airson 5 mionaidean gus èifeachdas elution àrdachadh.
6. Tha an leaghan elution a 'cruinneachadh ro bheag.
Moladh: Cleachd eluent airson elution DNA genomic mar a dh’ fheumar anns an stiùireadh, co-dhiù aig nach eil nas lugha na 15 μl.
Glanachd ìosal de DNA genomic iomallach
Faodaidh purrachd DNA genomic ìosal leantainn gu fàilligeadh no toraidhean neo-thaitneach de dheuchainnean sìos an abhainn, leithid: chan urrainnear enzymes a ghearradh fosgailte, chan urrainn dha PCR criomag ùidh gine fhaighinn, msaa.
Tha na h-adhbharan a dh’ fhaodadh a bhith mar a leanas:
1. Truailleadh heteroprotein, truailleadh RNA.
Mion-sgrùdadh: Cha deach an colbh glanaidh a nighe le bhith a’ cleachdadh Buffer PW;cha deach an colbh glanaidh nighe Buffer PW a nighe leis an astar ceud-ghluasadach ceart.
Moladh: Dèan cinnteach nach eil sileadh sam bith anns an supernatant mus cuir thu ethanol;bi cinnteach gun nigh thu an colbh glanaidh a rèir an stiùiridh, agus chan urrainnear an ceum seo fhàgail air falbh.
2. Truailleadh ion neo-thruaillidh.
Mion-sgrùdadh: Chaidh colbh glanaidh nighe bufair WB fhàgail air falbh no a nighe ach aon turas, a’ leantainn gu truailleadh ionic air fhàgail.
Moladh: Dèan cinnteach gun nigh thu Buffer WB 2 uair mar a chaidh a stiùireadh gus ianan fuigheall a thoirt air falbh cho mòr ‘s as urrainn.
3. RNA truailleadh enzyme.
Mion-sgrùdadh: Chaidh RNases cèin a chur ris a’ bhufair;Bha gnìomhachd nighe bufair PW ceàrr, agus mar thoradh air sin bha fuigheall RNase, a’ toirt buaidh air gnìomhachd deuchainneach RNA sìos an abhainn, leithid tar-sgrìobhadh in vitro.
Moladh: Faodaidh innealan aonaranachd searbhag niuclasach sreath Foregene RNA a thoirt air falbh gun RNase a bharrachd a chuir ris, mar sin chan fheum Kit Iomallach DNA Cairt Swab / FTA buccal RNase a chuir ris;bi cinnteach gun lean thu an stiùireadh airson colbh glanaidh nighe Buffer PW, agus chan urrainnear an ceum seo fhàgail air falbh.
4. Fuigheall ethanol.
Mion-sgrùdadh: Cha do rinn Buffer WB centrifugation tiùb falamh às deidh dha an colbh glanaidh a nighe.
Moladh: Dèan an obair centrifugation tiùb falamh ceart a rèir an stiùiridh.
5. Truailleadh neo-thruaillidheachd eile.
Mion-sgrùdadh: Chan eilear a’ làimhseachadh sampallan glèidhte no sampallan sònraichte.
Moladh: Thoir sùil mhionaideach air an sampall mar a chaidh iarraidh.
