Mar as trice bidh an co-mheas ìosal de A260 / A230 air adhbhrachadh le neo-chunbhalachd leis an tonn-uisge as àirde aig 230nm.Feuch sinn a-mach dè a tha anns na neo-chunbhalaidhean sin:

• Truailleadh cumanta	Wavelength sùghaidh	Buaidh co-mheas
  Pròtain	~ 230nm agus 280nm	Lùghdachadh aig an aon àm de A260/A 280agus A260/A 280co-mheasan
  Guanidine salann	220-240 nm	Lùghdaich A260/A 280co-mheas
  Feanól	~270nm	-
  Trizol	~ 230nm agus 270nm	Lùghdaich A260/A 280co-mheas
  EDTA	~230nm	Lùghdaich A260/A 280co-mheas
  Ethanol	230-240 nm	Lùghdaich A260/A 280co-mheas

 
 
 
Tonn ionsachaidh agus luach iomsgaradh truailleadh cumanta

Ptruailleadh rotein
Faodar truailleadh pròtain a mheas mar an truailleadh as cumanta ann am pròiseas às-tharraing searbhag niuclasach.Tha pròtain ann eadar an ìre uisgeach àrd agus an ìre as ìsleorganachìre.Lùghdaichidh truailleadh an co-mheas A260/A280 agus A260/A230 aig an aon àm, agus atharraichidh an co-mheas A260/A230 nas follaisiche na an co-mheas A260/A280.
Rè an dèidh sinath-sgrìobhadh air aisor Freagairtean qPCR, faodaidh fuigheall pròtain bacadh no bacadh a chuir air gnìomh enzyme.Is e an dòigh as fheàrr air truailleadh pròtain a sheachnadh a bhith a’ cumail cuimhne air a’ phrionnsapal “seach nas lugha na barrachd, beagan thursan” nuair a tha thu ag iarraidh an supernatant.

2. Truailleadh Guanidinium
Tha buaidh aig hydrochloride (GuHCl) agus guanidine thiocyanate (GTC) gu bhith a’ dì-nàdarachadh phròtainean, a dh’ fhaodas sgrios a dhèanamh gu sgiobalta air buill-bodhaig cealla rè pròiseas às-tharraing searbhag niuclasach, ag adhbhrachadh dì-nàdurachadh pròtain agus sileadh.Tha tonn-tonn an in-ghabhail de GuHCl agus GTC eadar 220-240 nm, agus anlughdaichidh salann guanidinium fuigheall an co-mheas de A260/A230.Ged a lùghdaicheas an salann guanidinium a tha air fhàgail an co-mheas,tha a’ bhuaidh air deuchainnean sìos an abhainn glè bheag.

3. Truailleadh trizol
Is e prìomh phàirt Trizol phenol.Is e prìomh obair phenol ceallan a lyse agus pròtanan agus stuthan searbhag niuclasach a leigeil ma sgaoil ann an ceallan.Ged is urrainn dha phenol pròtanan àicheadh ​​gu h-èifeachdach, chan urrainn dha bacadh iomlan a chuir air gnìomhachd RNase.Mar sin, tha 8 -hydroxyquinoline, guanidine isothiocyanate, β-mercaptoethanol, msaa air an cur ri TRIzol gus casg a chuir air RNase endogenous agus exogenous.
Nuair a bhios e a’ toirt a-mach RNA ceallach, faodaidh Trizol na ceallan a lìomhadh gu sgiobalta agus casg a chuir air an nuclease a chaidh a leigeil ma sgaoil bho na ceallan, agus lughdaichidh an Trizol fuigheall gu mòr an co-mheas de A260 / A230.
Dòigh giullachd: Nuair a bhios e a’ centrifuging, feumar a thoirt fa-near gu bheil am feanól ann an Trizol gu furasta solubhail anns an ìre uisge fo staid 4 ° agus teòthachd an t-seòmair.

4. Fuigheall ethanol
Bithear a’ cleachdadh ethanol anns a’ phròiseas mu dheireadh gus an DNA a sgaoileadh fhad ‘s a tha e a’ leaghadh ions salainn a dh’ fhaodadh a bhith ceangailte ris an DNA.Tha an tonn neo-làthaireachd an ìre as àirdestùc in-ghabhail deTha ethanol cuideachd aig 230-240 nm, a thalùghdaichidh e cuideachd an co-mheas de A260 / A230.
Faodar an dòigh air fuigheall ethanol a sheachnadh ath-aithris dà uair tron ​​​​fhuasgladh mu dheireadh, a’ sèideadh a-steach doncochall ceòairson dà mhionaid gus leigeil leis an ethanol làn fhalamhachadh mus cuir e bufair airson elution.
Ach, bu chòir fios a bhith againn nach eil anns a’ cho-mheas ach clàr measaidh de chàileachd RNA.Ma tha na h-obraichean gu h-àrd air an riaghladh gu teann, cha toir an gluasad eadar an co-mheas agus an raon àbhaisteach buaidh mhòr air deuchainnean sìos an abhainn.
Bathar co-cheangailte:
Pasgan Iomallach RNA Iomlan bheathaichean
Lusan pasgan Iomlan RNA Iomallach
Cell Iomlan RNA Kit Iomallach
Cuir pasgan Iomallach Iomlan RNA Plus