Air fhoillseachadh le: Prìomh obair-lann CAS de Microbio-eòlas Pathogen agus Imdhun-eòlas, Institiud Microbio-eòlas, Acadamaidh Saidheansan Shìona
Àireamh: 69.504
Bathar le taic:Cell Iomlan RNA Kit Iomallach
Ceangal tùsail:https://www.nature.com/articles/s41586-022-05271-2
Faodaidh galairean le filoviruses leithid bhìoras Ebola (EBOV) agus bhìoras Marburg droch chomharran clionaigeach adhbhrachadh, a’ toirt a-steach fiabhras hemorrhagic agus fàilligeadh ioma-organach4.An seo cho-dhùin sinn structar pròtain bhìoras Ebola L ann an iom-fhillte le tetrameric VP35 a ’cleachdadh microscopy cryo-electron (stàit 1).Nochd mion-sgrùdadh structarail gu bheil eileamaid cuir a-steach sònraichte aig Ebola bhìoras L a tha riatanach airson synthesis RNA, agus gu bheil VP35 ag eadar-obrachadh gu farsaing le sgìre N-terminal L le triùir luchd-iomairt den tetramer VP35.
Anns a’ phàipear seo, chaidh RNA iomlan a thoirt a-mach a’ cleachdadh ForegeneCell Iomlan RNA Kit Iomallachagus chaidh an ìre de RNA a thomhas le Nanodrop aig 260 nm, agus an uairsin dèan lorg RT / qPCR.
■ Tha am pròiseas air fad air obrachadh aig teòthachd an t-seòmair (15-25 ℃), às aonais amar deigh agus centrifugation aig teòthachd ìosal.
■ Tha an t-inneal gu lèir Saor bho RNase, cha leig thu leas dragh a bhith ort mu thruailleadh RNA.
■ Bidh Colbh Glanadh DNA a’ ceangal DNA gu sònraichte, gus an urrainn don phasgan truailleadh DNA genomic a thoirt air falbh gun DNase a bharrachd a chuir ris.
■ Toradh RNA àrd: Faodaidh Colbh RNA a-mhàin agus foirmle gun samhail RNA a ghlanadh gu h-èifeachdach.
■ Astar luath: furasta obrachadh agus faodar a chrìochnachadh ann an 11 mionaidean.
■ Sàbhailteachd: Chan eil feum air reagent organach.
■ Càileachd àrd: Tha an RNA fìor-ghlan de fhìor-ghlan, saor bho phròtain agus neo-chunbhalachd eile, agus faodaidh e coinneachadh ri diofar dheuchainnean às deidh sin.
Ùine puist: Samhain-04-2022
