Mar a tha fios agad

Mu dheidhinn Ntoirt a-mach searbhag ucleic

Tòiseachadh agus deireadh searbhag niuclasach fìor-ghlan

Tha a h-uile dad duilich aig an toiseach, is e searbhag niuclasach fìor-ghlan as motha

Initiation of molecular experiments, airson deuchainnean an dèidh làimhe

Tha buaidh chudromach aig soirbheachas no fàilligeadh.

Tha mòran de luchd-rannsachaidh saidheansail a’ còrdadh ri spectrphotometer UV trace/ultrace oir is urrainn dha dùmhlachd searbhag niuclasach agus fuigheall ionan pròtain is salainn a lorg gu sìmplidh, gu sgiobalta agus gu h-eaconamach.

Mar a tha fios againn uile, tha A260 a’ ciallachadh luach OD sùghadh searbhag niuclasach, tha A280 a’ ciallachadh luach OD sùghaidh dùmhlachd pròtain, tha A230 a’ ciallachadh luach OD sùghaidh ion-salainn, agus mar sin faodaidh A260 dùmhlachd searbhag niuclasach a thionndadh, tha A260/280 a’ ciallachadh fuigheall pròtain, tha A260/230 a’ ciallachadh fuigheall ion salainn, ach tha seo stèidhichte air àireamh mhòr de thoraidhean.gnàthach” a chreidsinn gun urrainn dha purrachd DNA agus RNA a mhìneachadh gugu ìre.Chan e seo an aon inbhe airson comharrachadh toradh searbhag niuclasach agus purrachd, chan eilear ga chleachdadh ach mar iomradh, agus chan e “inbhe òir” a th’ ann.

Tha leabhar-làimhe Thermo Fisher ND-2000 a’ cur cuideam air earbsachd toraidhean an deuchainn

Is e an t-adhbhar gu bheil na toraidhean a gheibhear le bhith a’ cleachdadh spectrophotometer UV micro/ultramicro a-mhàin a’ nochdadh toradh agus purrachd searbhag niuclasach bhon taobh, agus tha mòran fhactaran buadhach ann (slighe optigeach, meud sampall, dùmhlachd sampall, luach pH, ​​ian eile a bheir buaidh air tomhas sùghaidh, msaa), chan eil an luach OD tomhaiste gu riatanach ceart.Aig an aon àm, mar thoradh air dìth sònraichte an stuth dearbhaidh luach sùghaidh, tha stùcan sùghaidh aig DNA aon-shreath, DNA dà-shreath, RNA, dNTPs, agus cuid de phròtainean aig tonn-tonn 260nm, agus chan e an dùmhlachd a chaidh a dhearbhadh le A260 leis fhèin an fhìor DNA no RNA.Chan urrainnear breithneachadh a dhèanamh air dùmhlachd, agus ionracas agus truailleadh.

Mar sin ciamar a nì thu breithneachadh air càileachd ar searbhag niuclasach fìor-ghlan?A bharrachd air a bhith a’ cleachdadh microphotometer UV / ultramicro UV airson a lorg, tha feum air dòighean leithid electrophoresis gel agarose cuideachd gus purrachd agus ionracas searbhag niuclasach a thaisbeanadh gu fradharcach, agus an dùmhlachd a chomharrachadh gu ìre.San dòigh seo, tha an toradh searbhag niuclasach agus an purrachd a gheibhear bho thoraidhean lorg diofar dhòighean creidsinneach.

Coimeas cairt deuchainneach

Chaidh DNA genomic de cheallan H1299 a thoirt a-mach le bhith a’ cleachdadh innealan tarraing DNA companaidh A, agus chaidh truailleadh mòr neo-chunbhalachd fhaicinn, a’ leantainn gu luachan OD àrd

(luach tomhais OD agus electropherogram co-fhreagarrach)

Clàr-amais measaidh

A bheil “inbhe òir” ann airson toradh searbhag niuclasach agus deuchainn càileachd?

Cho fad ‘s as aithne dhuinn, chan eil dòigh shìmplidh, luath agus saor ann.Ge bith an e spectrophotometer, gel electrophoresis, no mass spectrometry a th’ ann, tha iad uile a’ nochdadh dùmhlachd agus purrachd searbhag niuclasach anns an fhuasgladh bho dhiofar thaobhan, agus feumar am breithneachadh le bhith a’ toirt iomradh air a chèile.

Tha an clàr-amais measaidh as fheàrr an-còmhnaidhan tagradh deuchainneach leantainneach.Chan eil e a’ toirt buaidh air èifeachdas tar-sgrìobhadh cùil agus leudachadh PCR.Tha a bhith a’ faighinn toraidhean leudachaidh earbsach agus luachan Ct, agus a’ faighinn sreath iomlan le bhith a’ leantainn sreath mar thoradh air searbhag niuclasach soirbheachail.

Gus geàrr-chunntas, bu chòir dùbhlan a thoirt don bheachd air teòiridh co-mheas a-mhàin leis a’ bheachd “a’ cleachdadh deagh thoraidhean deuchainneach sìos an abhainn mar pharaimearan às-tharraing math”!

Innealan às-tharraing DNA RNA Foregene a chaidh a mholadh gus purrachd DNA / RNA àrd fhaighinn:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/