1

Mu dheidhinn às-tharraing RNA

O chionn trithead bliadhna, airson às-tharraing RNA, cha b ’urrainn dhuinn smaoineachadh ach mar a gheibheadh ​​​​iad RNA iomlan, ge-tà, cha robh feum air astar às-tharraing (Rugadh Techology a’ chiad ghinealach an dòigh Trizol).Leis an ùrachadh ath-aithriseach air teicneòlas às-tharraing RNA, chan eil na as urrainn dhuinn a dhèanamh cuingealaichte ri bhith a’ faighinn thoraidhean.Nuair a bha iad an aghaidh a bhith a’ toirt a-mach na h-ath-bheachdan stèidhichte air Trizol den chiad ghinealach, bha luchd-deuchainn mar as trice fo thrioblaid leis na ceumannan obrachaidh trom aca;ged a bha e an dèidh mòran optimizations agus innleachdan, fhathast thug e tòrr ùine.Aig an aon àm, feumar ath-bheachdan organach leithid phenol agus cloroform a chleachdadh anns a ’phròiseas às-tharraing, a tha cuideachd a’ bagairt sàbhailteachd luchd-obrach iomchaidh gu ìre.

2Èifeachdach, goireasach agus sàbhailte

Tha a bhith a’ lorg toradh às-tharraing RNA èifeachdach, goireasach agus sàbhailte air a thighinn gu bhith na phrìomh amas aig luchd-deuchainn.Mar sin, thàinig an dòigh sùghaidh Silica Spin Colbh airson às-tharraing RNA gu bith.Bidh toraidhean às-tharraing RNA treas-ghinealach Foregene a’ tarraing air na buannachdan bho thoraidhean às-tharraing colbh ginealach roimhe, a’ cleachdadh (DNA-Cleaning + RNA a-mhàin) dà theicneòlas Spin Column gus gDNA agus sprùilleach clò a thoirt air falbh aig an aon àm, às aonais làimhseachadh DNase air gDNA fuigheall, agus gun a bhith a 'cleachdadh phenol, msaa tuilleadh.

Clàr coimeas pròiseas obrachaidh

3

Clàr coimeas toraidhean deuchainneach

Tha toradh àrd às-tharraing RNA aig pasgan iomallachd RNA iomlan Foregene, purrachd math, agus tha buaidh às-tharraing miRNA nas fheàrr na innealan branda eile

4

Electrophoresis de 50 mg de RNA iomlan grùthan na luchaige air a thoirt a-mach le diofar dhòighean
A’ chiad ghinealach (1: Trizol)
An dàrna ginealach (2: pasgan às-tharraing RNA bho chompanaidh A)
An treas ginealach (3: pasgan às-tharraing RNA a bharrachd bho chompanaidh A, 4: Foregene: innealan aonaranachd RNA)

graf qPCR (graf lùb leudachaidh)

Feumar DNA genomic a thoirt air falbh gu h-èifeachdach aig àm às-tharraing RNA, air neo bidh buaidh neo-riaghlaidh aige air deuchainnean sìos an abhainn (luach CT tràth, nithean ceàrr).Faodaidh pasgan ath-ghinealach Foregene DNA genomic a thoirt air falbh gu foirfe gun a bhith a’ cur DNase a-steach, a ’sàbhaladh mòran ùine, agus aig an aon àm a’ seachnadh truailleadh air adhbhrachadh le truailleadh RNase exogenous.
A 'chiad ghinealach (uaine a' comharrachadh TRlzol-, dearg a 'comharrachadh TRlzol +)

5An dàrna ginealach (tha Gorm a’ comharrachadh pasgan às-tharraing RNA Companaidh A -, tha dearg a’ comharrachadh pasgan às-tharraing RNA Companaidh A +)

6

An treas ginealach (gorm a’ comharrachadh companaidh A pasgan às-tharraing RNA a bharrachd, tha uaine a’ comharrachadh innealan Iomallach Foregene RNA)

7

(Nòta: tha “_” anns a’ ghraf qPCR a’ nochdadh nach deach DNase a chur ris, agus nach deach truailleadh DNA a thoirt air falbh; Tha “+” a’ nochdadh gun deach DNase a chur ris, agus gun deach truailleadh DNA a thoirt air falbh)

Cuir crìoch air às-tharraing RNA taobh a-staigh 11min

Gun fheum air bliadhnaichean de chruinneachadh de eòlas às-tharraing searbhag niuclasach, faodaidh toraidhean sreath innealan aonaranachd RNA làn-èifeachdais Foregene leigeil leat RNA àrd-toraidh agus fìor-ghlan fhaighinn taobh a-staigh 11 mionaidean gus coinneachadh ri diofar fheumalachdan deuchainneach sìos an abhainn.

9Gu ruige seo, tha toraidhean sreath innealan RNA isolaton iomlan Foregene air aithneachadh le àireamh mhòr de luchd-ceannach agus tha iad air cur ri mòran litreachasan le sgòr àrd.Tha fìor chleachdadh an neach-ceannach den chairt electrophoresis fios-air-ais agus an lùb meudachaidh cainneachdail PCR às deidh ath-sgrìobhadh cùil a’ sealltainn gu bheil an RNA a chaidh a thoirt a-mach le bhith a ’cleachdadh toraidhean Foregene chan ann a-mhàin àrd ann an dùmhlachd, ach cuideachd ann an deagh ionracas.Is e dìreach an teicneòlas toraidh a chaidh a dhearbhadh leis a ’mhargaidh as fheàrr leis a h-uile duine.

1011

Cell Iomlan RNA Kit Iomallach

Toradh àrd RNA

Fast: Cuir crìoch air aonaranachd RNA ann an 11 mionaidean

Sàbhailteachd: Chan eil ceimigeach organach air a chur ris

Cuid de luaidh le sgòr àrd:

1. Yuan Fang, Zezhong Liu, Yang Qiu, et al.Bidh casg air suppressor viral de phròtainean RNAi le peptides dealbhaiche a’ dìon bho ghalaran enteroviral in vivo, dìonachd, 54 (10), 2021: 2231-2244.e6.(IF: 31.745,Kit Iomallach RNA viral, Cat Àir.RE-02011)

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1074761321003617

2. Ren, Y., Wang, A., Wu, D. et al.Tha casg dùbailte air dìonachd dhùthchasach agus apoptosis le pròtain cytomegalovirus daonna UL37x1 a’ comasachadh ath-riochdachadh bhìoras èifeachdach.Nat Microbiol 7, 1041–1053 (2022).(IF: 30.964,Cell Iomlan RNA Kit Iomallach, Cat Àir.RE-03111)

https://doi.org/10.1038/s41564-022-01136-6


Ùine puist: Iuchar-27-2022