Ceistean Cumanta airsonPasgan Iomallach RNA Iomlan bheathaichean

Mion-sgrùdadh a leanas air na duilgheadasan a dh’ fhaodadh tu a thighinn tarsainnstuth beathach / às-tharraing RNA cealla will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

Chan eil RNA air a thoirt a-mach no tha toradh RNA ìosal

Gu tric bidh grunn nithean ann a bheir buaidh air èifeachdas ath-bheothachaidh, leithid: sampall clò susbaint RNA, dòigh-obrach, tomhas elution, msaa.

1. Chaidh centrifugation bath deighe no cryogenic (4 °C) a dhèanamh rè obrachadh.

Moladh: Obraich aig teòthachd an t-seòmair (15-25 ° C) tron ​​​​phròiseas gu lèir, na dèan amar deigh agus centrifuge aig teòthachd ìosal.

2. Glèidhteachas sampall neo-iomchaidh no cus ùine stòraidh sampall.

Moladh: Glèidh sampaill aig -80 ° C no reothadh ann an naitridean leaghan agus seachain cleachdadh reothadh is leaghaidh;feuch ri clò ùr no ceallan cultarach a chleachdadh airson às-tharraing RNA.

3. Gu leòr sampall lysis.

Moladh: Nuair a bhios tu a’ dèanamh homogenizing clò, dèan cinnteach gu bheil am maothran homogenized gu leòr agus gu bheil na ceallan maothraidh air an sgoltadh gu leòr gus sgaoileadh RNA a mhìneachadh.

4. Cha 'n 'eil an t-eluent air a chur ris gu ceart.

Moladh: Dearbhaich gu bheil RNase-Free ddH₂Tha O air a chur ris dropwise gu meadhan membran a’ cholbh glanaidh.

5. Cha deach an tomhas ceart de làn ethanol a chur ri Buffer RL2 no Buffer RW2.

Moladh: Lean an stiùireadh, cuir an tomhas ceart de làn ethanol gu Buffer RL2 agus Buffer RW2 agus measgachadh gu math mus cleachd thu am pasgan.

6. Chan eil dosage sampall meitabileach iomchaidh.

Moladh: Cleachd 10-20 mg de stuth clò no (1-5) × 10⁶ceallan gach 500 μl bufair RL1, oir faodaidh cus cleachdadh maothran leantainn gu lughdachadh RNA às-tharraing.

7. Meud elution neo-choileanta no elution neo-choileanta.

Moladh: Is e meud elution a’ cholbh glanaidh 50-200 μl;mura h-eil a’ bhuaidh elution riarachail, thathas a’ moladh an ùine suidheachaidh aig teòthachd an t-seòmair a leudachadh às deidh dha RNase-Free ddH a chur ris₂O, me airson 5-10 min.

8.Tha fuigheall ethanol aig a’ cholbh glanaidh às deidh nighe Buffer RW2.

Moladh: Ma tha fuigheall ethanol ann às deidh nighe Buffer RW2, centrifugation tiùb falamh airson 1min, faodar an ùine airson obrachadh centrifugation tiùb falamh àrdachadh gu 2min, no faodar an colbh glanaidh a chuir aig teòthachd an t-seòmair airson 5 mionaidean gus an ethanol fuigheall a thoirt air falbh gu h-iomchaidh.

Tha RNA puraichte air a dhol sìos

Tha càileachd an RNA fìor-ghlan co-cheangailte ri factaran leithid gleidheadh ​​​​an sampall, truailleadh RNase, agus làimhseachadh, msaa.

1. Chan eil sampallan clò-bhualaidh air an cumail ann an ùine.

Moladh: Mura tèid sampallan clò no ceallan a chleachdadh ann an deagh àm às deidh an cruinneachadh, sa bhad cryopreserve aig -80 ° C no nitrogen leaghaidh.Gus RNA a thoirt a-mach, cleachd sampall clò no cealla a chaidh a thogail às ùr nuair as urrainnear.

2. Reothadh a-rithist agus a 'leaghadh shampaill clò.

Moladh: Nuair a bhios tu a’ stòradh sampallan clò, tha e nas fheàrr an gearradh ann am pìosan beaga airson an glèidheadh, agus aon de na pìosan a thoirt air falbh nuair a bhios iad gan cleachdadh gus casg a chuir air reothadh an t-sampall a-rithist agus truailleadh RNA.

3. Tha RNase air a thoirt a-steach no gun a bhith a’ caitheamh miotagan cuidhteasach, aghaidhean choimheach, msaa rè an obrachaidh.

Moladh: Tha e nas fheàrr deuchainnean às-tharraing RNA a dhèanamh ann an seòmraichean làimhseachaidh RNA air leth agus tha am bòrd air fhuadach ron deuchainn.

Cleachd miotagan agus aghaidhean choimheach tron ​​​​deuchainn gus lughdachadh RNA air adhbhrachadh le toirt a-steach RNase a lughdachadh.

4. Tha ath-bheachdan air an truailleadh le RNase rè cleachdadh.

Moladh: Cuir pasgan Iomallach RNA Iomlan Ainmhidhean na àite airson deuchainnean co-cheangailte.

5. Tha na tiùban centrifuge, molaidhean, msaa a thathar a 'cleachdadh ann an làimhseachadh RNA air an truailleadh le RNase.

Moladh: Dearbhaich gu bheil na tiùban centrifuge, molaidhean, pìoban, msaa a thathas a’ cleachdadh ann an às-tharraing RNA uile saor bho RNase.

Bidh RNA puraichte a gheibhear a’ toirt buaidh air deuchainnean sìos an abhainn

Bidh RNA air a ghlanadh leis a’ cholbh glanaidh, ma tha na h-ianan salainn, susbaint pròtain ro mhòr a’ toirt buaidh air an deuchainn sìos an abhainn, leithid: tar-sgrìobhadh air ais, Northern Blot et al.

1. Tha fuigheall ion-salainn aig an RNA a tha air fhuasgladh.

Moladh: Dearbhaich gu bheil an tomhas ceart de ethanol air a chur ri Buffer RW2 agus dèan 2 nighe colbh glanaidh aig an astar ceud-ghluasadach a tha air a chomharrachadh airson obrachadh;ma tha fuigheall ian salainn ann, fàg an colbh glanaidh gu Buffer RW2 airson 5 min aig teòthachd an t-seòmair agus dèan centrifugation gus an tèid truailleadh salainn a thoirt air falbh.

2. Fuigheall ethanol ann an RNA elutioned.

Moladh: Dearbhaich, às deidh nighe bufair RW2, gun dèan thu an obair centrifugation tiùb falamh aig an astar ceud-ghluasadach a tha air a chomharrachadh airson obrachadh, àrdaich ùine gnìomhachd centrifugation tiùb falamh gu 2 min ma tha fuigheall ethanol ann fhathast, no fàg e aig teòthachd an t-seòmair airson 5 mionaidean às deidh an centrifugation tiùb falamh gus an ìre as àirde a thoirt air falbh fuigheall ethanol.

Iomallach de sheòrsan sampall searbhag nulceic

Faodaidh innealan Iomallach RNA Foregene aonaranachd / toirt air falbh RNA iomlan fhaighinn bho na stòran sampall a leanas: clò bheathaichean, planntrais, ceallan, bhìorasach, fuil, msaa.

Ciamar a stòradh an kit

Stòradh teòthachd seòmar airson 24 mìosan.