A bheil thu fhathast a’ cleachdadh Trizol gus RNA a thoirt a-mach?
Gosh, na leig leam dragh a ghabhail mu do shlàinte!
Tha Trizol gu bhith air an iomall, nach innis thu dhomh gu bheil thu fhathast anns an dorchadas?
Is e phenol am prìomh phàirt de imoibrí Trizol, agus tha ath-bheachdan organach leithid cloroform cuideachd air an cur ris anns an obair dheuchainneach.Bidh foillseachadh fad-ùine a’ dèanamh cron air do shlàinte, gu h-àraidh ma dh’ adhbhraicheas conaltradh dìreach ris a’ chraiceann losgadh mòr ceimigeach agus sgarfaichean maireannach.
Ann an suidheachaidhean àbhaisteach, chan urrainn dha com-pàirtichean obair-lann na cunnartan a lughdachadh ach le bhith gan armachd fhèin (a ’caitheamh còtaichean obair-lann, miotagan agus aghaidhean choimheach).
Agus is e mo chomhairle dhut: feuch an cuir thu an àite Trizol gu dìreach gus cron a sheachnadh bhon stòr.
1. A ’chiad toradh ginealach de às-tharraing RNA
Thig a-mach ann an 1987 (ath-bheachdan Trizol)
buannachd:
Às-tharraing nas coileanta
Eas-bhuannachdan:
Tha feum air ath-bheachdan puinnseanta leithid guanidine isothiocyanate-phenol-chloroform;
Obrachadh trom;
Feumar DNase a chleachdadh gus truailleadh DNA a thoirt air falbh
2.An dàrna ginealach toradh de tharraing RNA
Thig a-mach ann an 1994 (QIAGEN RNeasy agus a’ mhòr-chuid de thoraidhean dachaigheil)
buannachd:
Thathas a’ gabhail ri modh centrifugal colbh, a tha furasta obrachadh;
Eas-bhuannachd:
Feum air centrifuge gus sprùilleach clò a thoirt air falbh
Feumar DNase a chleachdadh gus truailleadh DNA a thoirt air falbh
3.An toradh treas ginealach de às-tharraing RNA
A’ tighinn a-mach ann an 2005 (QIAGEN RNeasy Plus agus ForegeneBathar sreath purchaidh RNA)
buannachd:
Cleachd colbh toirt air falbh DNA gu dìreach gus DNA agus sprùilleach clò a thoirt air falbh aig an aon àm, a’ sàbhaladh ùine agus oidhirp;
Sàbhailte agus goireasach, chan fheumar colbh sìoltachain agus DNase a chuir ris gus neo-chunbhalachd a thoirt air falbh gu furasta agus truailleadh DNA a sheachnadh
Bheir sinn sùil air na h-eadar-dhealachaidhean obrachaidh eadar toradh a’ chiad ghinealach (Trizol), toradh an dàrna ginealach (RNeasy) agus toradh treas ginealach (Foregene) de às-tharraing RNA:
Tha an obrachadh san fhigear soilleir: tha buannachdan follaiseach aig toradh an treas ginealach
Dìreach trì faclan airson cunntas a thoirt air: furasta!Luath!Sàbhailteachd
Clàr PK de thoraidhean deuchainnairsonna toraidhean ciad-ghinealach, dàrna ginealach agus treas ginealach de às-tharraing RNA:
A’ chiad ghinealach (1: Trizol)
Tha an dàrna ginealach (2: QIAGEN RNeasy)
Tha an treas ginealach (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)
Dè an seòrsa toradh a tha math, bidh fios agad le coimeas
RNA air a thoirt a-mach a’ cleachdadh pasgan Foregene
Chan e a-mhàin dùmhlachd àrd ach cuideachd ionracas math
Graf 2.qPCR (graf lùb leudachaidh)
Tha an dàrna ginealach (sky blueciallachadhQIAGEN RNeasy-, deargciallachadhQIAGEN RNeasy +)
An treas ginealach (gorm a’ ciallachadh Foregene, uaine a’ ciallachadh QIAGEN RNeasy plus)
(Nòta: Tha an graf QIAGEN RNeasy RNeasy de qPCR an dàrna ginealach a’ ciallachadh nach cuir an cromag DNase ris agus nach toir e air falbh truailleadh DNA. Mar sin, tha an CT nas àirde agus chan eil an toradh ceart; Tha QIAGEN RNeasy + a’ ciallachadh gun deach DNase a chur ris agus gun deach an truailleadh DNA a thoirt air falbh, agus gu bheil an toradh ceart)
Ge bith an e electrophoretogram a th’ ann no graf lùbte meudachaidh PCR cainneachdail, chan eil càileachd thoraidhean Foregene nas ìsle na toraidhean a chaidh a thoirt a-steach bho thall thairis.
Ùine puist: Iuchar-16-2021