• facebook
  • ceangailte
  • youtube

Tha antibodies, ris an canar cuideachd immunoglobulins (Ig), nan glycoproteins a tha gu sònraichte ceangailte ri antigens.
 
Tha ullachadh antibody àbhaisteach air a thoirt gu buil le bhith a’ banachdach bheathaichean agus a’ cruinneachadh antiserum.Mar sin, mar as trice bidh antibodies ann an antiserum an aghaidh antigens neo-cheangailte eile agus co-phàirtean pròtain eile anns an t-serum.Mar as trice tha grunn epitopes eadar-dhealaichte ann am moileciuilean antigen coitcheann, agus mar sin tha antibodies gnàthach cuideachd nan measgachadh de antibodies an aghaidh grunn epitopes eadar-dhealaichte.Tha eadhon na antibodies serum àbhaisteach a tha air an stiùireadh an aghaidh an aon epitope fhathast air an dèanamh suas de antibodies heterogeneous air an toirt a-mach le clones cealla B eadar-dhealaichte.Mar sin, canar antibodies polyclonal cuideachd ri antibodies serum àbhaisteach, no antibodies polyclonal airson ùine ghoirid.
 
Tha antibody monoclonal (antibody monoclonal) na antibody fìor èideadh air a thoirt gu buil le clon cealla B singilte agus dìreach air a stiùireadh an aghaidh epitope sònraichte.Mar as trice bidh e air ullachadh le teicneòlas hybridoma - tha teicneòlas antibody hybridoma stèidhichte air teicneòlas fusion cealla, a ’cothlamadh cheallan B leis a’ chomas a bhith a ’toirt a-steach antibodies sònraichte agus ceallan myeloma le comas fàis gun chrìoch a-steach do hybridomas cealla B.Tha feartan cealla pàrant aig a’ chill hybridoma seo.Faodaidh e leudachadh gu neo-chinnteach agus gu neo-bhàsmhor ann an vitro mar cheallan myeloma, agus faodaidh e antibodies sònraichte leithid lymphocytes splenic a cho-chur agus a chumail dìomhair.Tro chlònadh, gheibhear loidhne monoclonal a thàinig bho aon chealla hybridoma, is e sin, loidhne cealla hybridoma.Tha na antibodies a bhios e a’ dèanamh nan antibodies fìor aon-ghnèitheach an aghaidh an aon chinniche antigenic, is e sin, antibodies monoclonal.
 
Tha antibodies ann mar aon no barrachd monomers ann an cumadh Y (ie, antibodies monoclonal no antibodies polyclonal).Tha gach monomer ann an cumadh Y air a dhèanamh suas de 4 slabhraidhean polypeptide, a’ toirt a-steach dà shlabhraidh throm co-ionann agus dà shlabhraidh solais co-ionann.Tha slabhraidh aotrom agus slabhraidh throm air an ainmeachadh a rèir an cuideam moileciuil.Is e mullach an structair cumadh Y an roinn caochlaideach, a tha na làrach ceangail antigen.(Earrann bho Detai Bio-Monoclonal Antibody Concept)
 
Structar antibody
1Slabhraidh throm
Tha còig seòrsaichean de shlabhraidhean trom Ig mamail ann, air an ainmeachadh leis na litrichean Grèigeach α, δ, ε, γ, agus μ.Canar IgA, IgD, IgE, IgG, agus IgM ris na antibodies co-fhreagarrach.Tha diofar shlabhraidhean trom eadar-dhealaichte ann am meud agus cumadh.Tha timcheall air 450 amino-aigéid ann am α agus γ, agus tha timcheall air 550 amino-aigéid ann an μ agus ε.
Tha dà roinn aig gach slabhraidh trom: an roinn sheasmhach agus an roinn caochlaideach.Tha an aon roinn sheasmhach aig a h-uile antibodies den aon sheòrsa, ach tha eadar-dhealachaidhean eadar antibodies de dhiofar seòrsa.Tha na roinnean seasmhach de na slabhraidhean troma γ, α, agus δ air an dèanamh suas de thrì raointean Ig còmhla, le roinn lùdagach gus an sùbailteachd a mheudachadh;tha na roinnean seasmhach de na slabhraidhean troma μ agus ε air an dèanamh suas de raointean 4 Ig.Tha an roinn caochlaideach den t-sreath throm den antibody a chaidh a thoirt a-mach le diofar cheallan B eadar-dhealaichte, ach tha an roinn caochlaideach den antibody a chaidh a thoirt a-mach leis an aon chealla B no clone cealla mar an ceudna, agus tha an roinn caochlaideach de gach slabhraidh trom timcheall air 110 amino-aigéid de dh'fhaid., Agus cruth aon fhearainn Ig.
 
Slabhraidh aotrom
Chan eil ach dà sheòrsa slabhraidhean aotrom ann am mamalan: seòrsa lambda agus seòrsa kappa.Tha dà raon ceangailte aig gach slabhraidh solais: roinn sheasmhach agus roinn caochlaideach.Tha fad an t-sreath solais timcheall air 211 ~ 217 amino-aigéid.Tha an dà shlabhraidh aotrom anns gach antibody an-còmhnaidh mar an ceudna.Airson mamalan, chan eil ach aon seòrsa anns an t-sreath aotrom anns gach antibody: kappa no lambda.Ann an cuid de dhruim-altachain nas ìsle, leithid iasg cartilaginous (iasg cartilage) agus iasg tòidheach, lorgar seòrsachan eile de shlabhraidhean aotrom leithid an seòrsa iota (iota).
 
Earrannan Fab agus Fc
Faodar an roinn Fc a chur còmhla gu dìreach le enzyman no dathan flùraiseach gus antibodies a chomharrachadh.Is e seo am pàirt far a bheil an antibody rivets air a’ phlàta rè pròiseas ELISA, agus is e cuideachd am pàirt far a bheil an dàrna antibody air aithneachadh agus air a cheangal ann an immunoprecipitation, immunoblotting agus immunohistochemistry.Faodar antibodies a uisgeachadh ann an dà earrann F (ab) agus aon roinn Fc le enzyman proteolytic leithid papain, no faodar an briseadh bhon roinn lùdagach le pepsin agus an uisgeachadh ann an aon roinn F (ab) 2 agus aon roinn Fc.Tha pìosan antibody IgG uaireannan glè fheumail.Air sgàth dìth roinn Fc, cha bhith an roinn F (ab) a’ sileadh leis an antigen, agus cha bhith e air a ghlacadh le ceallan dìon ann an sgrùdaidhean in vivo.Mar thoradh air na mìrean beaga moileciuil agus dìth gnìomh tar-cheangail (mar thoradh air dìth earrann Fc), bidh an roinn Fab mar as trice air a chleachdadh airson radiolabeling ann an sgrùdaidhean gnìomh, agus tha an roinn Fc air a chleachdadh sa mhòr-chuid mar àidseant bacadh ann an staining histochemical.
 
Roinnean caochlaideach agus seasmhach
Tha an roinn caochlaideach (roinn V) suidhichte aig 1/5 no 1/4 (anns a bheil timcheall air 118 fuigheall aminoideach) den t-sreath H faisg air ceann-uidhe N agus 1/2 (anns a bheil timcheall air 108-111 fuigheall aminoideach) faisg air ceann-uidhe an t-sèine L.Tha fàinne peptide aig gach roinn V air a chruthachadh le bannan disulfide taobh a-staigh slabhraidh, agus tha timcheall air 67 gu 75 fuigheall aminoideach anns gach fàinne peptide.Bidh co-dhèanamh agus rèiteachadh amino-aigéid ann an roinn V a’ dearbhadh sònrachas ceangail antigen an antibody.Mar thoradh air na seòrsaichean agus an t-sreath de amino-aigéid a tha a’ sìor atharrachadh ann an roinn V, faodar iomadh seòrsa antibodies le diofar sònrachaidhean antigen ceangail a chruthachadh.Canar VL agus VH ri roinnean V den t-sreath L agus slabhraidh H, fa leth.Ann an VL agus VH, tha ìre nas àirde de dh’ eadar-dhealachadh ann an co-dhèanamh aminoideach agus sreath cuid de roinnean ionadail.Canar roinnean hypervariable (HVR) ris na roinnean sin.Tha co-dhèanamh aminoideach agus rèiteachadh nam pàirtean neo-HVR ann an roinn V gu ìre mhath glèidhteach, ris an canar an roinn frèam.Tha trì roinnean hypervariable ann an VL, mar as trice suidhichte aig fuigheall aminoideach 24 gu 34 agus 89 gu 97 fa leth.Canar HVR1, HVR2 agus HVR3 ris na trì HVRan de VL agus VH, fa leth.Dhearbh rannsachadh agus mion-sgrùdadh air eadar-dhealachadh criostail X-ray gur e an roinn hypervariable gu dearbh an t-àite far a bheil an antigen antibody a’ ceangal, agus mar sin canar an roinn co-dhùnaidh co-fhreagarrachd (CDR) ris.Faodar an HVR1, HVR2 agus HVR3 de VL agus VH a bhith air an ainmeachadh CDR1, CDR2 agus CDR3 fa leth.San fharsaingeachd, tha ìre nas àirde de hypervariability aig CDR3.Is e an roinn hypervariable cuideachd am prìomh àite far a bheil na dearbhadairean idiotypic de mholacilean Ig ann.Anns a 'mhòr-chuid de chùisean, tha àite nas cudromaiche aig slabhraidh H ann a bhith a' ceangal an antigen.
2An roinn seasmhach (sgìre C)suidhichte aig 3/4 no 4/5 (timcheall air bho aminoid 119 gu ceann-uidhe C) den t-sèine H faisg air ceann-uidhe C agus 1/2 (anns a bheil timcheall air 105 fuigheall aminoideach) faisg air ceann-uidhe C na slabhraidh L.Tha timcheall air 110 fuigheall aminoideach anns gach roinn gnìomh den t-sreath H, agus tha fàinne peptide ann air a dhèanamh suas de 50-60 fuigheall aminoideach ceangailte le bannan disulfide.Tha co-dhèanamh agus rèiteachadh amino-aigéid na roinne seo gu ìre mhath seasmhach anns an aon shlabhraidh beathach Ig isotype L agus an aon sheòrsa H slabhraidh.An aon rud, chan urrainn dha ach ceangal sònraichte a dhèanamh ris an antigen co-fhreagarrach, ach tha structar na sgìre C aige mar an ceudna, is e sin, tha an aon antigenicity aige.Faodar an antibody àrd-sgoile IgG anti-daonna (no anti-antibody) a chur còmhla ris an dà Tha measgachadh de antibodies (IgG) an aghaidh diofar exotoxins a 'tachairt.Tha seo na bhunait chudromach airson a bhith ag ullachadh antibodies àrd-sgoile agus a’ cleachdadh fluorescein, isotopan, enzymes agus antibodies le bileagan eile.
 
 
Bathar co-cheangailte:
Kit RT-qPCR Cell Direct

 

 


Ùine puist: Sultain-30-2021